CRISPR质粒构建
使用CRISPR / Cas9技术成功进行基因编辑的关键步骤包括sgRNA的设计和构建，sgRNA决定了打靶的特异性。百奥赛图专业的技术团队精心设计和检测sgRNA，确保其序列的高特异性和高活性。
服务说明
a.大小鼠外其它物种的基因靶向sgRNA设计请联系我们。
b.如需其它抗性基因和荧光报告基因标记可按照要求提供，请咨询我们。
c.可根据要求提供不同数量的质粒。可提供无内毒素的大提质粒。
d.我们提供如上所述体外sgRNA分析服务。
1.确认sgRNA靶向基因
2.设计sgRNA并与客户确认
3.构建和检测质粒
4.运输质粒和质量报告
CRISPR活性测定
设计sgRNA后，非常关键的一步是快速准确地选择高活性sgRNA。基于单链退火（SSA）机制（图1），百奥赛图开发了UCA检测方法，能够在体外高灵敏、便捷、快速测定sgRNA活性，同时UCA检测方法兼具高通量特点。
将CRISPR / Cas9真核表达质粒（表达Cas9和sgRNA）和pUCA质粒共转染到细胞中后，Cas9-sgRNA复合物将结合并切割对应于pUCA质粒上sgRNA的靶位点。触发SSA的DNA修复机制，当萤光素酶（er）的同源互补序列形成萤光素酶的完整编码序列时，该基因将被表达。萤光素酶活性表示sgRNA活性值；荧光素酶信号越高，表明sgRNA活性越高。
现在，许多sgRNA设计工具都具有预测sgRNA活性的功能。但预测结果和实际活性之间仍然存在很大差异。必须通过实验验证sgRNA活性，以确保后续实验的成功率。
我们的数据表明，UCA检测方法能够很好地预测sgRNA的体内活性，该方法已在高影响力期刊中引用。通过百奥赛图UCA系统检验的高活性sgRNA有助于CRISPR / Cas9基因编辑的成功。
服务优势
1.高效，快速：从sgRNA设计到通过活性测定总计2周时间
2.灵敏，准确且接近体内活性
3.没有物种限制
供体质粒构建
百奥赛图拥有10多年基因编辑课题经验，开发了数千个小鼠、大鼠和细胞系项目。可以构建用于基于ESC/EGE基因编辑的打靶载体和用于Tol2转基因的载体，提供快速的质粒设计和构建服务。
1. 确认目的基因，设计基因编辑策略
2. 设计质粒序列，并与客户确认
010-56967680
info@bbctg.com.cn