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技术问答
B-NDG小鼠饲养中有哪些注意事项?


  • 饲料 
百奥赛图B-NDG小鼠生产繁殖使用的是适合免疫缺陷鼠生长的特殊系饲料,采用的灭菌方式是60Co辐照灭菌,可以保证小鼠的健康生长和繁殖。


饲养B-NDG小鼠如果仅用于实验,不进行繁殖,我们建议使用适合免疫缺陷鼠的“SPF大小鼠生长繁殖饲料”( 经60Co辐照灭菌),粗蛋白含量≥20%,粗脂肪含量≥4% 。


  • 饮水 
百奥赛图的B-NDG小鼠是在隔离器软包中饲养的,符合高级别的无病原体环境。我们在动物饮用水上采用的是高压灭菌的酸化水(用HCl调节pH至2.5-3.0之后再高压灭菌),可有效预防假单胞菌和金黄色葡萄球菌的污染。



  • 垫料 
B-NDG小鼠属于免疫缺陷型小鼠,我们推荐使用刨花垫料。刨花垫料材质柔软蓬松有助于筑巢、吸湿性强、无异味。垫料同样需要经过高压或者60Co辐照灭菌处理,垫料每周更换一次。如不在隔离包饲养,需要在超净工作台更换垫料,而且需要使用消毒过的镊子转移小鼠到新的笼盒,避免用手直接接触小鼠。



  • 环境 
在饲养过程中,保证足够的光照强度(太强或太弱都不行)和光照时间,一般采用12小时光照,12小时黑暗的光照模式。环境温度应保持在20-26℃,日温差不超过4℃。


饲养笼盒材质要无毒无害,便于清洁和消毒,每周至少要清洗消毒一次。

为什么要进行适应性饲养?

所谓适应性饲养,是指实验动物由繁殖地转移到实验动物房以后,在实验之前,为了使之适应新环境而饲养几天的过程。因为在运输、转移过程中,动物会有应激反应,为消除应激反 应,一般需要进行为期7-15天的适应性饲养。

适应性饲养过程中注意哪些问题?

配置好饲养的条件,努力使之在“新家”舒服地过日子。密切观察其外观、毛发、排泄物、活动情况,这是考察动物是否有疾病的外在表现。注意与实验室原有饲养的动物隔开一定的距 离,其它动物的声音、排泄物的氨味会对新来的动物有一定的影响,适应性饲养是保证实验成功的前提之一。

个别小鼠在实验前出现死亡,可能的原因是什么,如何避免?

B-NDG是重度免疫缺陷鼠,对动物房的环境要求较高,建议按照说明说中的饲养问题注意事项严格控制饲养条件。

个别小鼠出现表型异常问题,如炸毛弓背现象,毛色发黄,自发肿瘤的情况,可能原因是什么, 如何避免?

小鼠毛发不顺和营养相关也和此品系轻微卷毛的特点相关;毛色发黄要确认是否有水瓶漏水的 情况,水瓶漏水会将垫料的颜色染到小鼠身上;自发肿瘤是这个品系小鼠偶发的情况,建议增加 营养,比如每周添加少量高压过的生瓜子或鸡蛋改善小鼠体质。注意降低人员进出换笼盒换水等操作产生的噪声对小鼠的影响。

PBMC免疫重建不成功的可能原因有?GVHD出现的时间是?是否存在推迟GVHD的方法?

PBMC重建成功与否主要由PBMC的状态影响,优良供体的PBMC重建成功率更高,正式实验前可以进行PBMC的筛选。根据公司内部实验数据,B-NDG小鼠PBMC免疫重建时,GVHD出现在注射后4W左右。如要推迟GVHD出现时间,建议相对减少PBMC用量,或者可以尝试迭代小鼠B-NDG B2M KO mice plus, 此小鼠的在相同剂量PBMC注射后,GVHD出现时间与野生B-NDG鼠相比有明显延迟。

B-NDG小鼠CD34免疫重建时,辐照剂量建议是多少?

公司内部用X射线辐照仪做过0-2.4Gy的梯度剂量,仅辐照B-NDG小鼠14天半数致死剂量是1.8Gy,公司采用1.2Gy剂量辐照后注射HSC细胞,生存率与体重保持良好,在重建14周后逐渐出现死亡。建议客户可根据自己的实验设备选择合适的剂量。在使用γ辐照源时,公司内部使用1.5-1.8Gy,建议客户根据自己的实验设备以及小鼠体重选择合适的剂量。

B-NDG小鼠有哪些肿瘤成功成瘤?

B-NDG是重度免疫缺陷鼠,适宜人源肿瘤细胞系或组织的移植。目前,公司内部有肺癌,肝癌,单核白血病,淋巴瘤细胞等成瘤模型。同时,客户发表文章中也展示了淋巴瘤,结直肠癌,小细胞肺癌等成瘤模型。

数据持续更新中,可联系info@bbctg.com.cn获取信息。